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[자연과학][實驗보고서] 액체크로마토그래피 - HPLC에 의한 카페인 analysis 實驗

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INTRODUCTION
배경 理論
1. 크로마토그래피
‘크로마토그래피는 현대화학의 강력한 분석기법 중 하나로, 이 분석법은 여러 成分이 혼합되어 있는 각종 시료를 成分 별로 분리하고 각 成分의 확인과 정량을 동시에 할 수 있는 전 분석법이다. 그 중 크로마토그래피는 다양한 분야에서 널리 활용되고 있는 유용한 도구이다.


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액체크로마토그래피 실험
( HPLC에 의한 카페인 분석 실험 )

ABSTRACT
화학에서 혼합물을 이루는 여러 물질을 알아낼 때는 많은 방법을 사용한다. 그리고 두 표준용액의 크로마토그램에서 얻는 표준곡선을 이용해 커피한잔에 들어있는 caffeine의 양을 추정해보도록 한다. 특히 이번 실험에…(skip)

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실험결과/기타

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다. 이에, 극성이 가장 큰 成分은 먼저 용리하고, 극성이 가장 작은 분석물을 가장 나중에 용리한다. 이번 실험에서는 고성능 액체 크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography; HPLC)를 이용하여 adenine과 caffeine의 retention time과 그들의 구조와의 관계를 살펴보고 각각의 흡수 스펙트럼을 조사해 각 물질이 잘 흡수하는 파장을 알아본다. 이는 여러 가지 종류가 있는데 특히 이동상 혹은 정지상에 따라 크게 분류할 수 있으며 HPLC는 액체를 이동상으로 하는 크로마토그래피이다. 이상적으로 이는 비극성 내지는 약한 극성의 화합물 분리에 적합한 방법이다 특히 이것은 사용하기 쉽고 효율이 좋으며 컬럼의 안정성이 높은 등의 특징에 더하여 유사 화합물 및 각기 다른 화합물의 동시분석이 가능하다’2) 는 長點이 있다아 특히 ‘RPC에서는 정지상이 탄화수소 류와 같은 비극성이며, 이동상으로는 물, 메탄올 또는 아세토니트릴과 같은 비교적 극성이 큰 용매를 사용한다.’1)
‘HPLC에서도 역상 크로마토그래피(Reversed phase Chromatography; RPC)란 비극성의 고정상과 극성의 이동상을 사용하는 것을 총칭하는 말로, 오늘날 가장 빈번하게 사용되는 일반적인 HPLC의 기법이다.

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